Medical Research

皮膚是人體的重要屏障，皮膚屏障受損將會影響傷口的愈合程度。傷口愈合過程分為止血、炎癥、增殖和重塑四個階段，這些階段都必須以適當的順序進行。傷口愈合的主要障礙包括糖尿病、血管功能不全和局部壓力變化。目前，皮膚創面的常規臨床治療方法主要有手術清創、負壓治療和反復換藥等。然而，由于在愈合過程中傷口內的細胞功能失調，這些方法的治療效果差強人意。干細胞分泌的外泌體可促進創面組織的再生和修復，但不具有靶向性和持續性，嚴重限制了其治療潛力。針對這一問題，皮膚專家研究具有持續釋放外泌體促進創面修復的重組人III型膠原蛋白水凝膠促進創面組織的再生與修復。

重組人Ⅲ型膠原蛋白(RhCol III)具有水溶性好、無病毒隱患、排斥率低、生產工藝穩定等優點。為了實現外泌體（EVs）的定點持續釋放，我們以蒙巴拉鏈霉菌轉谷氨酰胺酶(TGase)為交聯劑，制備了孔徑均勻、生物相容性好的重組人Ⅲ型膠原蛋白水凝膠。結果表明，rhCol III-EVs水凝膠可作為一種新型的EVs載體生物材料，在皮膚創面修復中具有重要的潛在應用價值。

圖1水凝膠的制備與表征

以蒙巴拉鏈霉菌轉谷氨酰胺酶(TGase)為交聯劑制備的重組人Col III水凝膠可以將外泌體持續釋放到外部環境中（圖1）。通過細胞實驗檢測，結果表明rhCol III-EVs水凝膠有效地促進了巨噬細胞由M1型向M2型轉化，促進了小鼠成纖維細胞（L929）的遷移能力和人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）的血管生成（圖2）。

圖2細胞模型功效檢測

為了評價rhCol III-EVs水凝膠的修復治療效果，還研究了其對糖尿病大鼠背部皮膚傷口愈合的調節作用(圖3)。Rh Col III水凝膠組、EVs組和rh Col III-EVS水凝膠組均能顯著提高創面修復效果，促進創面愈合。值得注意的是，rhCol III-EVs水凝膠組的效果最佳。使用后第14天，rhCol III-EVs水凝膠組創面愈合率高達94%。rhCol III-EVs水凝膠組在傷口的皮膚肉芽組織中的效果更為明顯。通過Masson染色，發現rhCol III-EVs水凝膠組有更多的膠原沉積和有序的纖維。上述結果表明該團隊所設計的rhCol III-EVs復合水凝膠能夠促進糖尿病創面的組織再生和膠原沉積。

圖3重組人膠體III水凝膠動物模型功效檢測

普略醫學持續關注皮膚健康領域，并研發最新緩釋載藥技術。使用TGase酶交聯劑制備的rhCol III水凝膠，可以成功地將其負載到Huc-MSCs分泌的EVS中。RhCol III-EVs水凝膠實現了EVS的局部緩釋，有效地促進了創面細胞的抗炎、增殖、遷移和成管能力。此外，作為糖尿病大鼠傷口的敷料，它還能促進傷口愈合和組織再生?？傊?，多功能rhCol III-EVs水凝膠可以實現EVS的持續釋放，促進創面愈合，為慢性創面的治療提供了一種新的途徑。